James Hepburn, 4. jarl av Bothwell, (født 1535? - død 4. april 1578, Dragsholm, Sjaelland, Den.), Tredje ektemann til Mary, dronningen av skotten. Han konstruerte tydeligvis drapet på Marias andre ektemann, Henry Stewart, Lord Darnley, og utfalte derved opprøret av de skotske adelsmennene og Marias fly til England, hvor hun ble fengslet av dronning Elizabeth I og til slutt henrettet.
Sønnen til Patrick Hepburn, 3. jarl av Bothwell, lyktes Hepburn til farens tittel i 1556. Selv om han var protestant, støttet han den katolske Mary of Lorraine, som var regent for den unge dronningen Mary Stuart, i hennes kamp mot de protestantiske skotske adelsmennene. Etter Mary of Lorraines død i 1560 overtok Mary Stuart kontroll over regjeringen, og i 1561 ble Bothwell medlem av hennes Privy Council. Men han ble snart omfavnet i en feide med den mektige, men avhengige jarlen av Arran. Både anklaget av Arran for å ha planlagt å kidnappe dronningen, ble Bothwell fengslet i Edinburgh Castle i mars 1562. Han slapp unna påfølgende august og nådde Frankrike i september 1564 etter en periode av internering i England.
Året etter ble begge tilbakekalt til Skottland for å hjelpe til med å undertrykke opprøret til Marias halvbror, James Stewart, jarl fra Moray, som hadde motarbeidet ekteskapet hennes (i juli 1565) med Lord Darnley. Bothwell vant deretter dronningens hengivenhet ved å oppføre seg lojalitet og snarrådighet under de kritiske hendelsene rundt drapet den 9. mars 1566 av hennes sekretær, David Riccio, etter anledning av Darnley. Ved slutten av året hadde Mary gjort Bothwell til den mektigste adelen i Sør-Skottland, og hun oppfordret ham til å bli mannen hennes.
Da Darnley ble myrdet i 1567, anklaget den offentlige opinionen umiddelbartwell for å utføre forbrytelsen med Marias medvirkning. Han ble frikjent i en åpenbart rigget rettssak, og han bodde allerede med Mary og skilte tidlig i mai fra sin første kone. Mary og Bothwell ble gift av protestantiske ritualer 15. mai, dagen etter skapelsen hans som hertug av Orknøyene og Shetland. Paret møtte snart opprør av en koalisjon av protestantiske og katolske adelsmenn, som anså Bothwell som en usurper. Dronningens styrker møtte opprørerne ved Carberry Hill nær Edinburgh 15. juni, og da troppene hennes nektet å kjempe, overga hun seg under forutsetning av at Bothwell fikk lov til å rømme. Han flyktet nordover, først til Orknøyene og Shetland, deretter til Danmark, hvor han ble tatt i varetekt av kong Frederick II. I juni 1573, etter sammenbruddet av Marias sak i Skottland, ble Bothwell plassert i ensom innesperring i et slott på Dragsholm, hvor han døde, sinnssykt, fem år senere. Mary hadde fått en annullering av ekteskapet deres i 1570.
