Charles University, tsjekkiske Universita Karlova, også kalt University of Prague, statskontrollert institusjon for høyere læring i Praha, Tsjekkia. Skolen ble grunnlagt i 1348 av den hellige romerske keiseren Charles IV, som den tar navnet fra. Det var det første universitetet i Sentral-Europa. Blant bygningene, spredt over hele Praha, er Carolinum, en av de eldste eksisterende universitetsbygningene i verden.
En tidlig rektor ved universitetet, valgt i 1409, var den bohemske religiøse reformatoren Jan Hus. I løpet av 1600-tallet døpte jesuittene institusjonen Charles-Ferdinand University etter den hellige romerske keiseren Ferdinand II, som plasserte universitetet under deres kontroll, men på slutten av 1700-tallet, en periode med undertrykkelse av jesuitter, ble det en statlig institusjon. I 1882 ble det delt inn i separate tsjekkiske og tyske institusjoner, hver kalt Charles-Ferdinand. Da universitetet ble gjenåpnet etter andre verdenskrig (1945), ble det tyske universitetet opphevet.
Charles University består av fakultetene matematikk og fysikk, naturvitenskap, allmennmedisin, pediatri, humaniora, jus, journalistikk og utdanning. Medfølgende er også Astronomical Institute og Institute of Teacher Education.
